今天我们来看一下鉴定蛋白质,以下6个关于鉴定蛋白质的观点希望能帮助到您找到想要的百科知识。
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鉴别蛋白质的方法有哪些
常见的蛋白质鉴定方法有:
一、最简单的方法就是对所要鉴定的物体进行灼烧
二、使用化学药剂进行化学反应来鉴定蛋白质
三、较为精准的方法是使用仪器进行蛋白质鉴定,如质谱仪等
在生物学研究中经常会遇到一些关于蛋白质鉴定的问题,如单一蛋白质或者简单混合物的鉴定;对单一蛋白质的序列分析等。这一类蛋白质鉴定,在精密度上要求较高,所以几乎都是采用质谱仪器,来对蛋白质进行精密鉴定。
质谱技术是鉴定蛋白质的其中一种平台技术。可用到的质谱仪有Thermo Fisher的Q Exactive质谱仪,LTQ Orbitrap Velos质谱仪,以及AB SCIEX的6500 Q TRAP质谱仪。所在鉴定机构的不同,在硬件品牌的使用上也会有不同。
蛋白质鉴定的流程一般分三大步:蛋白质提取、纯化、鉴定。这个流程是一个将蛋白质层层“解剖”的过程,从中我们可以对蛋白分子量进行测定,蛋白胶点、胶条、IP样品蛋白质进行鉴定,非变性质谱分析以及Pull-down靶蛋白质谱鉴定等,较为细致的去分析蛋白质中的各种物质、性质等。
鉴定蛋白质有哪些方法?
蛋白质含量的测定:
1 凯氏定氮法
根据氮在蛋白质分子中含量恒定(平均占16%),因此测定出样品中氮的含量后,即可求出样品中蛋白质含量。
2 双缩脲法
3 福林-酚试剂法
福林-酚试剂包括两种试剂:碱性铜试剂,磷钼酸及磷钨酸的混合试剂。碱性铜试剂与蛋白质产生双缩脲反应。这种被作用的蛋白质中的酚基(酪氨酸),在碱性条件下易将磷钼酸和磷钨酸还原成蓝色的钼蓝和钨蓝,所生成蓝色的深浅,与蛋白质的含量成正比。在650nm和660nm波长下测定光吸收值,即可测定蛋白质含量。
4 紫外吸收法
酪氨酸,色氨酸在280nm处左右具有最大吸收。由于在各种蛋白质中这几种氨基酸含量差别不大,所以280nm的吸收值与浓度呈正相关。可用于蛋白质浓度的测定。
蛋白质的鉴定方法?
1.最简单的方法,也是人们最耳熟能详的方法,就是对物体进行灼烧,看是否能问到烧焦的羽毛味,如果可以问到烧焦的羽毛味,那么证明有蛋白质的存在。
2.中学的化学课上也教过我们不少的方法,比如说吧蛋白质和浓HNO3进行反应,如果能够变性产生黄色不溶性物质,那么该物体是蛋白质。
3.还有一种方法就是把含有蛋白质的屋子磨成浆然后过滤,取滤液进行测试,可以先在滤液中加氢氧化钠(NaOH),然后再加入双缩脲试剂,如果出现紫色反应,就为蛋白质。
一般采用什么方法检验蛋白质即鉴定?
一般用双缩脲试剂鉴定,双缩脲试剂可以和蛋白质发生紫色反应。
蛋白质检验实验步骤
选择高蛋白的食物浆液,比如豆浆和蛋清。然后准备检测蛋白质的双缩脲试剂,由A液和B液组成,A液:氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液。B液:硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。
在实验时,需要现在待测液体中先在加入A液,先制造出碱性环境,满足B液与蛋白质反应的条件,这样才可以方便进行蛋白质的检测。一段时间后,如果试管中的液体变为紫色,说明待测液体中含有蛋白质,而且颜色深浅与蛋白质浓度成正比。
扩展资料:
蛋白质检验注意事项:
用户需要注意样品应是均匀的,若是固体样品应事先研细过筛,液体样要混合均匀。
样品放入凯氏烧瓶时,不要黏附瓶颈上,万一黏附可用少量水缓慢冲下,以免被检样消化不完全,使结果偏低。
如果称1g以上的样品,就需要K氏烧瓶最小500ml,800~1000ml的更好,这样的K氏烧瓶对于缩短氨化时间,加热的均匀性和完全氨化效果最好。
参考资料来源:百度百科-蛋白质浓度测定
“蛋白质的鉴定”实验怎么做?
鉴定蛋白质有多种方法 1,在待测液中加入双缩脲试剂并水浴加热有紫色物质生成 2,在待测液中加入稀硝酸并加热变为淡黄色3,若为固体,则放到酒精灯上加热,可以闻到烧焦的羽毛气味
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