今天我们来看一下pcr试剂,以下6个关于pcr试剂的观点希望能帮助到您找到想要的百科知识。
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什么是PCR试剂?
PCR试剂简单的理解就是用于做PCR的试剂。
实际做PCR的试剂很多,在这儿可以理解为达到PCR级别的试剂。试剂中不应该存在对PCR反应有影响的杂质。象核酸、核酸酶,如果是水的话,盐离子尽可能的小,最好是超纯水。象一些盐类,分析纯的就可以达到要求。
如果想做PCR,买点TAQ酶,dNTP就够了,引物找公司合成,模板自己提取。
pcr扩增用的试剂有哪些?
pcr扩增所用的试剂:
pcr扩增步骤:
1.细菌染色体DNA的提取(见上一组)
2.RAPD反应体系的配置(上图)
3·反应程序:将RAPD反应试剂加入EP管中 轻混后用100ul石蜡油覆盖于反应混合液之上,防止样品在反复加热-冷却的过程中蒸发,盖好盖子。
打开PCR反应仪输入以下反应数据
· 94 摄氏度预变性5min
· 94摄氏度变性40s
· 40摄氏度退火40s
· 72摄氏度延伸1min
将EP管放入仪器开始扩增,循环35次;72摄氏度延伸10min
注意事项:
1、PCR反应体系中DNA样品及各种试剂的用量都极少,必须严格注意吸样量的准确性及全部放入反应体系中。
2、为避免污染凡是用在PCR反应中的Tip尖、离心管、蒸馏水都要灭菌;吸每种试剂时都要换新的灭菌Tip尖。
3、加试剂时先加消毒三蒸水,最后加DNA模板和Taq DNA聚合酶。
4、置PCR仪进行PCR反应前,PCR管要盖紧,否则使液体蒸发影响PCR反应。
5、引物条件首先引物与模板的序列要紧密互补,其次引物与引物之间避免形成稳定二聚体或发夹结构,再次引物不能在模板的非目的位点引发DNA聚合反应(即错配)。
PCR试剂有哪几类,怎样区分
我想pcr的试剂应该这样分类
1.提取试剂,包括了各种提取dna的常用试剂,和纯化dna所用的试剂
2.pcr扩增试剂:主要是taq酶,dntp(四种碱基),缓冲试剂(buffer),引物
3.产物检测试剂:琼脂糖,聚丙烯酰胺凝胶,aps,tmed,eb等等吧
不过你到底要问什么?!好像没这么问的吧!!
pcr试剂应该冷冻保存放在几区
扩增区。PCR实验室内每个房间的所有进、出风口均需加装高效过滤器,标本处理间必须配备A2生物安全柜和通风橱并有外连,外连出口需加高效过滤膜。
定量PCR要购买哪些试剂和材料
主要你看你的样本是DNA还是RNA;一般需要TAQ酶,dntp,Mg2+离子等buffer,还需要你模板,引物,探针;如果是RNA还需要反转录酶;目前市面上都有mix基本上都是混合好的,你这边只需要设计探针,提取相关的核酸样本就可以了;所以你首先要有提取试剂盒,提取你所需要样本的核酸dna或者RNA;然后设计你需要的引物或者探针(引物或者探针一般来说如果是常坐的实验基本上查现成的都能用一般NCBI上就可以查到)如果是不常做的实验,就需要先提取,然后做测序,然后根据序列设计相应的引物和探针,这个过程一般有专门的公司会做,但是需要自己会弄这套;模板,探针,引物,还有上面的mix弄好后,根据自己的体系,加进去你所做试验的pcr管子(单管或者排管一般是8联和12联排有平盖的,也有凸盖的,有透明的和不透明的,根据你的仪器来选择)然后设置循环,就可以扩增,然后分析数据了;这个是一个系统的工程,还需要结合你的实际;基本上的实验室仪器和耗材肯定是要有的,接下来的都是为这个实验做准备;可以私信我,告诉你的需求,我这边专门做这块的,希望能合作
PCR实验都需要什么试剂啊?
需要1 缓冲液(分为含二价Mg和不含的,不含的就还要MgCl2)
2 dNTP
3 引物
4 模板
5 酶
如果你买MIX的话,就只需要MIX,模板以及引物。
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