今天我们来看一下菌种活化,以下6个关于菌种活化的观点希望能帮助到您找到想要的百科知识。
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什么是菌种活化?
菌种活化就是逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境
如何对微生物菌种进行活化
方法如下:
1 定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可;
2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次;
3 沙土管法保存菌种在复苏时,在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面;
4 真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿管顶部烧热, 用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培养液溶解菌块,使用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养;
5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养
6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。
菌种活化
(1)以还原乳作培养基,依脱脂乳粉与蒸馏水以1:9(w/w)比例混合, 于三角锥瓶溶解搅拌均匀。 (2)使用脱脂棉牛皮纸紧闭封口后,于121℃20分钟进行高压灭菌,后冷却 至37~42℃。 (3)利用微量吸管以培养基与菌原比为15:1(v/v)之比例进行接种。 (4)接种菌原后,将其置于37℃培养箱12~18小时,至培养基成凝 固狀即表示活化成功
菌种的活化与种子扩大培养的区别
菌种活化:目的是让保藏菌种从休眠状态转变成对数生长状态,以便菌种能很快适应扩大培养的需要。操作是接种保藏菌种于固体斜面。
种子扩大培养: 目的是经过逐级扩大培养,最后获得供生产车间发酵罐接种的足够数量和优质质量的种子。
发酵工程流程图(由于不能插入图片,只好简单绘制一下):
保藏菌种→斜面种子→三角瓶液体培养→种子罐→发酵罐→发酵液分离纯化→成品
保藏菌种→斜面种子这个步骤叫“活化”;斜面种子→三角瓶液体培养→种子罐叫“扩大培养”。种子罐的大小和数量根据生产对种子数量的需要而定,但是种子在种子罐中扩大培养的次数(称作:种子罐级数)不能超过4次,最好不超过3次,因:每扩大一次就需要接一次种,这会增加杂菌污染的几率和菌种变异、退化的几率。
如何进行微生物活化?
菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境
要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。目前国际国内常用的菌种保存方法包括:定期移植法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、80℃
冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。
对于不同的保存方式活化的方式也不同:
1
定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可;
2
液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次;
3
沙土管法保存菌种在复苏时,在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面;
4
真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿管顶部烧热,
用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培养液溶解菌块,使用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养;
5
-80℃
冰箱冻结法保存菌种复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养
6
液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃
冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。
总结一下菌种活化需要以下几个步骤:
第一配置菌种适宜生长的培养基
第二将菌种从保藏状态恢复到室温状态,比如将冷冻的菌种解冻
第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养,此步骤称为菌种复壮
第四步挑选培养基茁壮的菌落,挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养,重复此步骤2-3次,从而得到生长良好的菌落
经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的
希望对你有帮助!
如何对微生物菌种进行活化?能否更具体一些
有同学已经说的很专业了,我就给你说些简单实用的。不知道你出于何种目的要进行活化。如果你是用冻存管保存的菌株进行活化,取出2颗小珠放在适宜的固体培养基上,合上盖让小珠在平皿上滚动,适宜条件培养就可以了。长出一个菌落,你再繁殖就可以了。如果你是冻干粉的菌种,准备适宜的液体培养基,少少一点点粉末接种就可以了,根据此菌种一般液体培养所需时间,大概在36-48h,你还可以在观察到液体浑浊、试管底部有沉淀时(沉淀者也可能为原本死亡的细菌),取100微升液体涂抹在固体培养基上。 一般的话,复苏的菌种需要重复几次复壮。
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